幽门螺杆菌（Helicobacter pylori，H. pylori ）是人类胃黏膜常见定植菌，长久以来和人类宿主保持密切联系，与慢性胃炎、消化性溃疡和胃癌等多种上消化 道疾病的发生有关，但与反流性食管炎（Reflux esophagitis，RE）和巴雷特食管（Barrett’s esophagus，BE）的关系尚存争议。一项Meta 研究发现 H. pylori 根除 治疗组内镜下RE 诊断率显著高于未接受治疗组，尤其是在40-50 岁、随访时间＞1 年、消化性溃疡的亚洲患者，但根除组与对照组之间反流症状无显著性差异[1]。与之相反，另一项研究表明，H. pylori 根除似乎不会增加胃食管反流病（Gastroesophageal reflux disease，GERD）的发生率，反而能显著改善GERD 症 状[2]。也有研究认为 H. pylori 感染与RE 发生负相关，但存在地域差异[3]。过去40 年食管腺癌（Esophageal adenocarcinoma，EAC）在西方国家发病率迅速上升、 已超过食管鳞癌的流行率，存活超过5 年的EAC 患者不超过20%，随 H. pylori 感染率下降，RE 发病率也在快速增长，RE 通过形成癌前病变BE 与EAC 相关， 因此进一步探究 H. pylori 对RE 的影响意义重大[4]。一些机制的探索为阐明 H. pylori 与RE 的关系提供了一些线索。H. pylori 定 植引起胃黏膜炎症反应、炎性因子释放，H. pylori 自身组分蛋白与胃黏膜细胞表 面受体相互作用，通过影响生长抑素及胃泌素水平影响胃黏膜泌酸，通过影响H+,K+-ATP 酶的表达抑制壁细胞泌酸活性，胃体或胃底持续性 H. pylori 感染还会 导致胃腺进行性丧失，胃体/全胃黏膜萎缩，出现永久性泌酸减少，因而可能对 反流性疾病具有保护作用[5, 6]。正如《马斯特里赫特IV/佛罗伦萨共识》指出，H. pylori 感染后的胃内情况的转归还取决于其毒力因子及宿主的遗传背景，基因型 多态性与其致病性密切相关，细胞毒素相关基因A（Cytotoxin-associated gene A，CagA）和空泡毒素A（Vacuolating cytotoxin A，VacA）目前被认为起到最重要 作用[7]。有研究显示CagA 阳性 H. pylori 菌株，似乎对反流性疾病具有更强的保 护作用[8, 9]。在RE 患者中广泛开展毒力检测及分型可能有助于进一步明确不同 毒力株对RE 患者的影响，并为感染 H. pylori 的RE 患者制定个性化治疗方案[10]。 另外，食管微生态的改变同样是食管炎症性疾病的发病基础，尤其是下段食 管与胃紧密相连，胃内菌群会随着胃酸反流进入食管下段，菌群组成更容易受到 胃酸、胃内微生态的影响[11]。微生物群可能通过与中心肥胖、GERD、H. pylori 、质子泵抑制剂和抗生素等危险因素相互作用而与BE 和EAC 相关[12, 13]。其中，H. pylori 感染是影响正常胃部菌群多样性和组成的重要因素,与胃癌发生发展及预后密切 相关，可能通过促进或抑制部分细菌的生长影响反流性疾病的发生发展[14]。Meta 分析发现 H. pylori 与BE 之间存在负相关关系，亚组分析时 H. pylori 既往感染对BE 的保护作用消失[15]，基于滑县、临朐的人群横断面研究同样发现，RE 组 H. pylori 嗜银染色(Warth-Starry, WS)阳性率显著低于对照组，但H. pylori抗体阳性 率在RE 及对照组之间无显著差异，提示 H. pylori 不同的感染状态对RE 的影响 有所不同。 综上所述，H. pylori 感染率逐渐下降同时，RE 呈现上升趋势[16]，目前 H. pylori 与RE 的关系尚存争议，可能的病生理机制有待进一步探究。基于 H. pylori 感染可能通过影响胃黏膜炎症、胃酸反流、胃内微生态发挥对RE 的保护作用，H. pylori 毒力分型影响疾病转归的背景，本课题于全国多中心纳入RE 患者，探索 H. pylori 毒力分型及胃内环境与RE 的相关性。 研究目的： 探究不同毒力 H. pylori 感染及胃内环境与 RE 的相关性。 研究对象： 纳入标准：1）符合反流性食管炎的诊断，初次诊断参照《2020 年中国胃食管反流病专家共识》推荐的反流性食管炎洛杉矶分级标准[17]； 2）18 岁≤年龄≤70 岁； 排除标准：1）合并胃溃疡、十二指肠溃疡、恶性肿瘤、肝胆器质性疾病、胰腺 器质性疾病、消化道手术史； 2）合并妊娠、哺乳、自身免疫性疾病或精神疾病； 3）合并慢性疾病控制不佳； 4）1 月内使用过抗生素、抑酸药、益生菌、糖皮质激素、免疫抑制 剂、抗焦虑、抑郁药； 5）同一天进行胃肠镜检查（洗肠液影响胃液pH值）； 研究方法： 既往国内研究 RE 患者的 H. pylori 感染率为 28.69%-62.08%，不同研究差异 较大[18, 19]。取 RE 患者 H. pylori 感染率为 P=50%，取α=0.05 置信度为 95%、误 差ε=0.05，根据公式： 计算得到样本量为 384 例。假设研究对象失访率为 10%、问卷不合格率为10%，则所需样本量为 474 例。采用多中心横断面研究方法，于全国 10 家中心同步纳入符合条件的研究对 象，每中心入组洛杉矶分级C/D级的RE 患者比例为 20%以上。 标本获取： 1）胃镜下诊断 RE 患者留取以下样本：胃液 2-5ml，食管黏膜 2 块、胃体及 胃窦黏膜各 2 块，用于 pH 检测、病理学诊断及菌群分析。 2）研究对象留取血样标本并完善尿素呼气试验（Urea breath test，UBT）检 测 H. pylori。 标本处理： 1）黏膜活检：食管、胃窦及胃体黏膜各取2 块活检，其中各1 块送病理， 其余各1 块黏膜，分别置于2ml 无菌冻存管中，液氮转运至实验室-80℃冰箱保 存，样本采集完成后统一送Illumina MiniSeq 测序平台对其16S rRNA 进行测序； 2）胃液标本：胃镜进入胃部后、冲洗及活检前留取胃液，患者可正常使用局麻药，如需使用消泡剂需在留取胃液后经胃镜注入，以一次性使用无菌吸痰管（II 型） 抽取 2-5ml 胃液，转运至实验室离心后，取上清液检测胃液内 pH，剩余标本-80℃ 冰箱保存。 3）血样：使用黄色促凝管采空腹静脉血 5ml，室温静置后离心分离血细胞及血清，取血清进行 CagA、VacA、Urea、G-17、PGI、PGII 检测，剩余血清分装后-80℃冰箱保存； 主要指标： ①WS 染色、UBT 试验；②CagA、VacA、Urea、G-17、PGI、PGII；③RE洛杉矶分级、炎症及异型增生程度；④胃黏膜炎症活动、肠化、萎缩、异型增生等（明 确胃体为主或胃窦为主）；⑤胃液 pH 测定；⑥胃内菌群多样性及组成；⑦问卷调查：胃食管反流病问卷（GerdQ 问卷）、流行病学调查表、《成人罗马 IV 标 准上消化道功能性疾病调查问卷》。 统计分析： 分析 H. pylori 毒力分型及胃内环境与RE 相关性。另外，根据WS 染色、UBT 及Urea 检测结果分组，WS+和/或UBT+认为是现症感染，WS-且UBT-认 为是非感染或既往感染，将研究对象分为现症感染组（WS+和/或UBT+，Urea+）、 既往感染组（WS-且UBT-，Urea+）、非感染组（WS-、UBT-、Urea-）进行比较，探究 H. pylori 现症感染、既往感染与无感染对RE 的影响是否相同。  请输入客服专席提供的登录密码 * 立即登录 请输入客服专席提供的登录密码 * 立即登录 请输入客服专席提供的登录密码 * 立即登录 请输入客服专席提供的登录密码 * 立即登录 请输入客服专席提供的登录密码 * 立即登录 请输入客服专席提供的登录密码 * 立即登录 请输入客服专席提供的登录密码 * 立即登录 请输入客服专席提供的登录密码 * 立即登录 请输入客服专席提供的登录密码 * 立即登录 请输入客服专席提供的登录密码 * 立即登录 请输入客服专席提供的登录密码 * 立即登录 |
